将荧光探针或荧光团（荧光染料或蛋白质）与第二抗体或抗生蛋白链菌素偶联，以使分析物可视化。每种荧光团都有其特定的光谱特征，激发和发射光谱特定于分子。使用光谱查看器构建染色面板并比较染料对您的应用的适用性。
荧光偶联物可促进多种技术同时检测多种分析物，包括流式细胞仪，荧光显微镜（epifluorescence，共聚焦，多光子和超分辨率技术），Western印迹和ELISA。每个荧光团都有自己的光谱特征，激发和发射光谱是分子特有的。使用光谱查看器通过绘制各个染料的特性和仪器设置来构建适合您的实验的染料板。对于多种标记方案，染整板的选择受到仪器和样品规格（例如可用的激光和滤光片）的限制。为了实现良好的分色，请选择光谱重叠最少的荧光团。
图1：使用Spectra Viewer绘制染料的光谱特性，以构建适合您的应用的染料板。
如何选择荧光团
荧光探针的选择取决于许多实验变量。
仪器
考虑激发能力（灯，激光或LED确定激发波长）以及可用通道和滤光片的数量。用户应查看仪器随附的滤波器组的参数。长通滤光片可提供最佳灵敏度，而窄带通滤光片可在多种标记应用中区分来自不同荧光团的信号。
使用我们的Spectra查看器来开发面板并构建特定于您的仪器的染色面板。
要求分色的程度
为了在多个标记方案中实现良好的分色，请选择
光谱重叠最少的荧光团。
实验样品
选择光谱不与内源性荧光重叠的荧光团。在可用的滤光片组下检查未染色的样品，以确定样品是否表现出自发荧光。
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Fluorophore-selection-and-panel-building-8211-Spectra-Viewer.pdf – 已下载32次 – 123.20 KB（文章来源：Jackson ImmunoResearch）