基本描述:
偶氮甲烷(氧化偶氮甲烷),英文Azoxymethane,缩写AOM,可有效诱导大小鼠结肠癌,广泛用作一种基质引起实验动物发生结肠肿瘤,从而研究癌症预防物和癌症形成机制。另外,越来越多结肠癌病例的发生,使得癌症预防物的研究也越来越流行。按照每周一次皮下注射AOM(15mg/kg体重)进入大鼠体内,连续3周给药。数周后能观察到癌前期病变。
作用机制:偶氮甲烷(AOM)能诱导DNA产生O6-甲基鸟嘌加合物,导致G→A转化。
主要应用:偶氮甲烷(AOM)常联合DSS(Mw:36000-50000 Da)注射动物,建立结肠癌模型,用来研究癌症发展机制和化学预防。
基本特征:
1) CAS NO. 25843-45-2
2) 线性分子式:CH3N=N(→O)CH3【C2H6N2O】
3) 分子量:74.08
4) 纯度:≥98%
5) 结构式:
结肠癌(Colon cancer)模型建立案例:
1、 文献来源:Wirtz S, et al. Chemically induced mouse models of intestinal inflammation. Nat Protoc. 2007; 2(3):541-6.
1.1 DSS溶液制备(2% DSS溶液):溶解10gDSS于500ml无菌的饮用水中,使用前溶液保存在4℃,最好现配现用。
1.2 AOM溶液制备:用无菌水溶解AOM配制10 mg/ml的储存液,分装后放到-20℃保存,避免反复冻融。使用之前,融化分装母液并用无菌生理盐水1:10倍稀释。
1.3 小鼠结肠炎相关的依赖性结直肠癌造模方法
1) 第1天称重和标记小鼠;
2) 按10 mg/kg体重的剂量腹腔注射AOM溶液;
3) 加DSS溶液灌满小鼠笼内的饮水槽,以5ml DSS溶液/小鼠/天加量,对照小鼠加等体积不含DSS的饮用水;
4) 第3天清空笼子内剩余的DSS饮用水,过两天重新装满DSS溶液;
5) 第5天清空笼子内剩余的DSS饮用水,重新装满DSS溶液;
6) 第8天清空笼子内剩余的DSS溶液,换上不含DSS的无菌水持续14天;
7) 第22-26天重复第3)-5)步;
8) 第29天清空笼子内剩余的DSS溶液,换上不含DSS的无菌水持续14天;
9) 第43-47天重复第3)-5)步;
10)第50天清空笼子内剩余的DSS溶液,换上不含DSS的无菌水;
2、文献来源:Neufert C, et al. An inducible mouse model of colon carcinogenesis for the analysis of sporadic and inflammation-driven tumor progression. Nat Protoc. 2007; 2(8):1998-2004.
2.1 DSS溶液制备(2.5% DSS溶液):称取2.5g DSS溶于100ml无菌水,本溶液置于4℃可稳定保存1周。最好现配现用。
2.2 AOM溶液制备:用无菌水溶解AOM配制10 mg/ml的储存液,分装后放到-20℃保存,避免反复冻融。AOM在水或生理盐水中的稳定性高于PBS缓冲液,且在玻璃管内稳定性好于塑料管。使用之前,融化分装母液并用无菌生理盐水1:10倍稀释。
2.3 小鼠结肠癌造模方法
1)第1天称重,等数分组并标记小鼠;
2)按照10mg/kg体重的浓度计算所需的AOM量,取适量的AOM储存液(10mg/ml)用无菌生理盐水1:10倍稀释。
3)腹腔注射AOM工作液(剂量10mg/kg体重,则10g体重小鼠注射100ul工作液)到实验组小鼠,同时注射等体积的无菌生理盐水到对照组小鼠。
4)自此步之后,按照两种方法继续实验。若建立自发性肿瘤进展模型,见方案A;若建立慢性炎症驱动的肿瘤进展模型,见方案B。
方案A,自发性肿瘤进展模型
A1,第8天重复步骤1)-3);
A2,第15天重复步骤1)-3);
A3,第22天重复步骤1)-3);
A4,第29天重复步骤1)-3);
A5,第36天重复步骤1)-3);【到这步每只小鼠都腹腔注射给药6次】
A6,第一次注射后的3个月评估癌前病变,此时不需处死动物。
A7,第一次注射后的6个月评估肿瘤发展。
方案B,慢性炎症驱动的肿瘤进展(Chronic inflammation-driven tumor progression)
B1,制备2.5%(wt/v)DSS溶液。此浓度的DSS能让FVB/N小鼠和其他品系产生良好的造模效果。
B2,按3天的用量加DSS溶液灌满小鼠笼内的饮水槽,以5ml DSS溶液/小鼠/天用量,对照小鼠加等体积不含DSS的饮用水;
B3,第4天清空饮水槽内残留DSS溶液,并且重新灌满另2天所需量的新鲜DSS溶液。
B4,第6天清空饮水槽内残留DSS溶液,并且重新灌满另2天所需量的新鲜DSS溶液。
B5,第8天清空饮水槽内残留DSS溶液,并且重新灌满灭菌水。
B6,第22-29日重复步骤B1)-B5)。
B7,第40日评估癌前病变,此时不需处死动物。
B8,第53-60日重复步骤B1)-B5)。
B9,第80日评估肿瘤发展。
2.4 AOM诱导肿瘤图示(图1)
图1.内窥镜肿瘤调研。通过迷你腔镜监测AOM诱导的肿瘤形成情况。a)还能用于纵向研究;b)对于肿瘤负荷分析,每只小鼠的肿瘤大小按照预设的时间点记录并做总和。
Azoxymethane(AOM)订购信息:原装正品,欢迎来电咨询,021-54736159,QQ2716000500。
品牌 |
货号 | 名称 | CAS NO. | 规格 | 目录价(元) |
MPbio | 0218397125 | Azoxymethane 偶氮甲烷 | 25843-45-2 | 25mg |
3361.3 |
MPbio | 0218397180 | Azoxymethane 偶氮甲烷 | 25843-45-2 | 100mg |
9450 |
DSS(Mw:36000-50000 Da)订购信息:现货促销,量大价更优,欢迎来电咨询。
品牌 | 货号 | 名称 | 规格 | 目录价(元) | 促销活动 |
MPbio | 0216011010 | DSS(Mw:36000-50000 Da)硫酸葡聚糖钠盐 | 10g | 2178 |
100g 500g 5折促销, 现货供应 |
MPbio | 0216011050 | DSS(Mw:36000-50000 Da)硫酸葡聚糖钠盐 | 50g | 5445 | |
MPbio | 0216011080 | DSS(Mw:36000-50000 Da)硫酸葡聚糖钠盐 | 100g | 8167.5 | |
MPbio | 0216011090 | DSS(Mw:36000-50000 Da)硫酸葡聚糖钠盐 | 500g | 33759 |
注意事项
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
— — Written/Edited by V. Shallan【版权归欧宝网址入口 生物/MKBio懋康所有】